Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Набор предназначен для оперативного выделения высококачественной геномной ДНК (гДНК) из дрожжей, основанного на технологии спин-колонок с силикагелевой мембраной. Этот метод обеспечивает быструю и эффективную очистку гДНК без использования токсичных реагентов, таких как фенол и хлороформ.

В основе набора лежит способность ДНК сорбироваться на мембране из диоксида кремния в присутствии хаотропных солей. После лизиса дрожжевых клеток и добавления связывающего буфера, ДНК селективно связывается с мембраной спин-колонки. Затем проводятся этапы промывки для удаления контаминантов, таких как белки, РНК и клеточные остатки. Наконец, чистая гДНК элюируется с колонки низкосолевым буфером или водой. Выделенная гДНК идеально подходит для большинства молекулярно-биологических экспериментов, для ПЦР и количественной ПЦР (qPCR), гибридизации по Саузерну и Нозерну, гидролиза эндонуклеазами рестрикции, секвенирования и т.д.

Преимущества набора для выделения геномной ДНК из дрожжей SPINeasy DNA for Yeast

• Быстрая процедура выделения (менее 30 минут);
• количество образца до 4×10⁸ клеток;
• объем образца 50-200 мкл;
• выход гДНК до 12 мкг (зависит от образца);
• не требуется экстракция фенолом/хлороформом или осаждение спиртом;
• выделенная гДНК свободна от ингибиторов ПЦР и пригодна для широкого спектра молекулярно-биологических применений;
• готовые к использованию буферы и оптимизированный протокол.

Условия хранения: комнатная температура.

• быстрое выделение чистой ДНК, готовой к использованию;
• нет стадий органической экстракции или спиртовой преципитации;
• стабильный высокий выход ДНК;
• ДНК свободна от ингибиторов и других примесей.

Набор предназначен для выделения ДНК из слюны. Очистка ДНК происходит за счёт её связывания с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата, пригодного для большинства молекулярно-биологических манипуляций, например, ПЦР.

Набор предназначен для выделения геномной ДНК из сперматозоидов. Очистка ДНК происходит за счёт её связывания с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата, пригодного для большинства молекулярно-биологических манипуляций, например, ПЦР. Все реагенты, кроме раствора Протеиназы К, могут храниться при комнатной температуре. Раствор Протеиназы К необходимо хранить при -20 °С.

• культур животных клеток;
• животных тканей;
• цельной крови;
• лейкоцитарного осадка;
• слюны;
• спермы.
  

SPINeasy DNA/RNA/Protein All-In-One Kit использует удобный рабочий процесс и спин-колонки с силикагелевой мембраной для выделения компонентов ДНК, РНК и белка из одного и того же образца без использования токсичных веществ, таких как фенол и хлороформ. Специально разработанный буфер лизиса R и лизинговая матрица A в сочетании с инструментами FastPrep от MP Biomedicals обеспечивает высокоэффективный лизис образцов тканей в течение нескольких секунд. Возможно использование вортекса, если FastPrep Instrument недоступен. Затем ДНК, РНК и белки последовательно очищают от одного и того же лизата. Вкратце, ДНК адсорбируется на первой спиновой колонке, в то время как сквозной поток собирается и используется для очистки РНК. Вторая спиновая колонка захватывает РНК, и поток с этой стадии используется для экстракции белка. ДНК и РНК связываются на первой и второй колонках соответственно, а затем промываются и элюируются. В конечной экстракции белки осаждают из раствора, осаждают центрифугированием, промывают и ресуспендируют. Затем каждый полученный компонент немедленно становится доступным для соответствующих последующих применений.

Преимущества набора для выделения ДНК, РНК и белка из одного и того же образца SPINeasy DNA/RNA/Protein All-In-One

• Количество образца: 1×10⁶ клеток, 10–30 мг ткани животных;
• объём образца 50–100 мкл для ДНК/РНК;
• не требуется экстракция фенолом/хлороформом или осаждение спиртом;
• ключевые применения: ПЦР, ОТ‑ПЦР, синтез кДНК, Вестерн‑блот, ИФА, секвенирование, NGS.

Условия хранения: ДНКаза I — 2-8 °C. Все остальные компоненты набора SPINeasy DNA/RNA/Protein All-in-One — комнатная температура

Примечание: при длительном хранении или при влажности <40%, спин-колонки должны храниться при 2-8 °C.

Набор обеспечивает выделение высококачественной микробной геномной ДНК (бактериальной и грибковой) из широкого спектра клинических, пищевых и экологических образцов с использованием спин колонок с силикагелевой мембраной.

Оптимизированная буферная система обеспечивает высокий выход и степень очистки ДНК, достаточные для её непосредственного применения в кПЦР, ПЦР, рестрикционном анализе, секвенировании и других молекулярно биологических приложениях без дополнительных стадий доочистки от ингибиторов.

Тип образца

Микробные культуры, биологические жидкости (бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ), мокрота, кровь, слюна, моча, плазма/сыворотка), образцы окружающей среды (почва, кал, вода/фильтры воздуха), пищевые и молочные продукты.

Объём образца

• Жидкие образцы, мкл — 100-200;
• твёрдые образцы, мг — 100-500.

Состав набора

• Буфер уравновешивания (Equilibration Buffer) — 12 мл;
• буфер MB1, мл — 45;
• буфер MB2, мл — 17;
• буфер MB3, мл — 21×2 флакона;
• буфер MB4, мл — 28;
• буфер MB5, мл — 20× 2 флакона;
• буфер MB6, мл — 10;
• раствор РНКазы A, мл — 2;
• спин-колонки, шт — 50;
• пробирки для сбора объёмом 1,5 мл — 50 шт.

Условия хранения

Хранить при комнатной температуре (15-25 °C) в сухом месте. Рекомендуемый срок хранения компонентов набора — 12 месяцев с даты производства.

Колонки Freez’N Squeeze для выделения ДНК из агарозного геля предназначены для быстрого и эффективного извлечения фрагментов ДНК длиной 50 – 23000 н.п. из агарозного геля. ДНК подходит для последующего секвенирования, ПЦР, лигирования, мечения, рестрикционныого анализа и др.