Спецпредложения | Оборудование, приборы | Пластик, стекло, принадлежности | Химические реактивы, препараты, наборы |
Предметный указатель | Библиотека | |||||||
![]() |
![]() Иммунофенотипирование клеток крови проточным цитофлуориметром, 1 лазер, до 5 флуоресцентных каналов, 7S BioSino
01.12.2022
Проточный цитометр 7S имеет 5 детекторов (FL1-FL5), включая FSC, SSC. Детекторы прямого (FSC) и бокового (SSC) светорассеяния представляют собой фотодиоды. Одновременное измерение прямого и бокового светорассеяния без окраски клеток крови флуоресцентными красителями, позволяет выделить все клеточные популяции лейкоцитов. Пять детекторов (FL1-FL5) собирают сигналы флуоресценции: FL1: 525/50 (FITC - флуоресцеин изотиоцианат, которое используется в широком спектре приложений, включая проточную цитометрию), FL2: 585/40 (фикоэритрин PE- фикоэритрин), FL3: 630/30 (PE-Texas Red/ECD/PI), FL4: 697/60 (PerCP (белок хлорофилла – перидин-хлорофилл протеин), PE-Cy5 (Тандем цианин-5/фикоэритрин ) / PE-Cy5.5), FL5: 780/60 (PE-Cy7). Цель работы1) Показать адекватность полученных результатов на стандартном образце крови здорового человека с использованием проточного цитометра 7S. 2) Показать способность анализировать, идентифицировать отдельные классы, подклассы, популяции, субпопуляции клеток крови путем измерения их поверхностных и/или внутриклеточных маркеров проточным цитометром 7S. Материалы и методыДля выполнения работ использовали кров здорового человека, которая хранилась в пробирках с ЭДТА K3 при комнатной температуре. Использовали лизирующий буфер, фосфатно-солевой буфер (PBS) и флуоресцентно-меченые антитела от производителя BioSino; одноразовые пробирки 12 × 75 мм, (микроцентрифужные пробирки объемом 1,5 мл, 2 мл) и вортекс. Подготовку образца проводили по стандартной методике. РезультатыАнализ основных популяций периферической крови человека В-лимфоциты, Т-лимфоциты, Натуральные киллеры", Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ). ![]() Рисунок 1. Иммунофенотипирование клеток осуществлено с помощью проточного цитофлуориметра, 1 лазер, до 5 флуоресцентных каналов, 7S, BioSino. На изображении представлено иммунофенотипирование лимфоцитов крови человека. Выделены популяции: В-лимфоциты, T-лимфоциты, Т-"натуральные киллеры" (НК-Т), "Натуральные киллеры" НК. а) На первом рисунке дот-плот показаны клетки здоровой неокрашенной периферической крови с установленным порогом threshold по прямому светорассеянию. Четко видно разделение всех популяций: лимфоцитов, моноцитов и гранулоцитов. Клетки внутри ворота (гейтирование) дополнительно проанализированы на экспрессию маркеров CD19PECy7, CD3PECy5, CD16FITC, CD56FITC. б) Разделение популяции Т и B лимфоцитов по маркерам CD3PECy5 и CD19PECy7. в) Разделение популяции NK-клеток по маркерам CD16FITC/ CD56FITC и Т-цитотоксических лимфоцитов (Натуральные Т-клетки-киллеры (Т-NK)) по маркерам CD3 PECy5, CD16 FITC, CD56 FITC. ЗаключениеНа основании результатов данного исследования можно сделать вывод о том, что проточный цитометр 7S с реагентами производителя BioSino обеспечивают точные результаты при анализе популяций T-, B- и NK-лимфоцитов в образцах крови здоровых людей, собранных в пробирки с ЭДТА K3 и хранившихся при комнатной температуре до 24 часов. Информация для заказа:
Пока нет данных. Перейти в каталог
См. также: Системы многопараметрического анализа клеток Счетчики клеток, анализаторы жизнеспособности Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме: |
С помощью личного кабинета Вы сможете: