Возможно, вы сменили регион при заполнении корзины.
Часть товаров из корзины будет перемещена в статус отложенных
и не сможет быть оформлена для заказа, если вы продолжите работу в данном регионе
На главную / Новости / Актуальность использования проточной цитометрии в ветеринарии и животноводстве
Актуальность использования проточной цитометрии в ветеринарии и животноводстве
15.08.2023
В последние годы применение проточной цитофлуориметрии (цитометрии) стало набирать популярность в ветеринарии и животноводстве, открывая новые возможности для диагностики как домашних, так и сельскохозяйственных животных, особенно при оценке иммунологического состояния.
Основным преимуществом проточной цитометрии является высокая скорость анализа частиц (до десятков тысяч в секунду) и получение статистически достоверных качественных и количественных данных по анализируемому образцу. При этом каждая клетка анализируется отдельно. С помощью проточной цитометрии можно изучать морфологию клеток, их поверхностные антигены, жизнеспособность, клеточный цикл, пролиферацию, апоптоз и пр.
Благодаря большому выбору моноклональных антител, конъюгированных с различными флуорохромами, в одном исследовании крови животных можно получить максимальную информацию о наличии или отсутствии различных патологий. Это позволяет ветеринарным врачам и исследователям проводить разнообразные анализы и получать точные результаты в кратчайшие сроки.
Компания Диаэм предлагает поближе познакомится с новыми проточными цитофлуориметрами (цитометрами) компании BioSino, Китай в нашей лаборатории в Москве, где Вы можете опробовать их в деле на своем образце!
Применение проточной цитометрии в ветеринарии и животноводстве
Проточная цитометрия может использоваться в ветеринарии для широкого спектра задач:
Диагностика патологий крови. Например, выявление бешенства, паразитемий, различного вида анемий.
Фармакодинамический мониторинг лекарственных препаратов для лечения животных. Например, исследование фармакодинамики циклоспорина – мощного лекарства, подавляющего выработку Т-клеток, используемого в ветеринарии для лечения воспалительных и аутоиммунных состояний.
Анализ клеточных маркеров опухолевых клеток, определение их типа и степень злокачественности. Проточная цитометрия позволяет в кратчайшие сроки выявить острый лейкоз.
Примеры применения проточной цитометрии
В качестве примеров применения проточной цитометрии в животноводстве можно привести:
Определение параметров коровьего молока в зависимости от состояния здоровья вымени.
Рис. 1. Стратегия гейтирования популяций лейкоцитов молока и экспрессии CD11b. A) Определение живых и мертвых клеток (LD-). B) Гейтирование CD45+ клеток в молоке. C) Отбор живых популяций лимфоцитов, макрофагов и полиморфноядерные лейкоциты (PMNs). D) Экспрессия CD11b на CD45+ клетках.
Количественная оценка соматических клеток в коровьем молоке после различных физико-химических обработок. Ниже представлен протокол исследования молока.
Рис. 2. Краткое описание экспериментальной схемы подготовки соматических клеток и различных методов обработки: хранение в молоке или PBS в течение 72 ч, параметры центрифугирования и тепловой обработки.
Количественное определение содержания ДНК спермы быков-производителей. Окрашивание образцов проводят красителем Hoechst 33342, который проникает в клетку и ядро и связывается избирательно с аденин-тиминовыми областями ДНК. Анализ сигнала флуоресценции позволяет исследователю дифференцировать X- и Y-сперматозоиды и разделить сперму по полу – получить сексированное семя, применение которого может существенно повысить продуктивность животноводческого предприятия.
Рис. 3. Схема получения сексированного семени быка-производителя с помощью проточной цитометрии.
Рис. 4. Гейтирование сперматозоидов, окрашенных Hoechst 33342. а) Отбор сперматозоидов по окраске FDA: область R1 – живые FDA-, R2 - мертвые FDA+. б) Гейтирование по окраске Hoechst 33342. (c) Гистограмма, показывающие два пика, соответствующие сигналам флуоресценции, генерируемым сперматозоидами, несущими Х- и Y-хромосомы.
В заключение, проточная цитометрия – это мощный инструмент, применение которого в диагностике и исследованиях значительно сокращает время получения результатов анализа образцов, способствуя таким образом улучшению качества ветеринарии и повышению комфорта и благополучия домашних и сельскохозяйственных животных.
Список использованной литературы
1) Li N, Richoux R, Perruchot M-H, Boutinaud M, Mayol J-F, Gagnaire V (2015) Flow Cytometry Approach to Quantify the Viability of Milk Somatic Cell Counts after Various Physico-Chemical Treatments. PLoS ONE 10(12): e0146071.
2) De Matteis G, Grandoni F, Scatà MC, Catillo G, Moioli B, Buttazzoni L. Flow Cytometry-Detected Immunological Markers and on Farm Recorded Parameters in Composite Cow Milk as Related to Udder Health Status. Veterinary Sciences. 2020; 7(3):114.
3) Yata V.K (2022). Sperm Sexing Using Flow Cytometry: Principles and Applications. In: Sperm Sexing and its Role in Livestock Production. Springer, Singapore.
Проточный цитометр SinoCyte от BioSino представляет собой высокопроизводительную, компактную и удобную в использовании систему с поддержкой до трех каналов и 18 параметров флуоресценции. Благодаря широкому спектру применения проточный цитометр SinoCyt является мощным инструментом для исследователей в различных областях, включая онкологию, иммунологию, исследования стволовых клеток, клеточную биологию, океанографию, мониторинг окружающей среды и клиническую диагностику.
Области применения
Онкология и гематология: анализ клеток крови, обнаружение дендритных клеток, цитотоксических Т-клеток, Т-клеточных рецепторов и Р-селектина.
Иммунология: обнаружение пролиферирующих Т-клеток, изотипов иммуноглобулинов, NK-клеток и регуляторных Т-клеток.
Стволовые клетки: анализ гемопоэтических стволовых клеток, обнаружение CAR-T-клеток и анализ мезенхимальных стромальных клеток
Клеточная биология: клеточная пролиферация, клеточный цикл и анализ апоптоза.
Океанография: обнаружение морских микроорганизмов, количественный анализ ДНК и определение содержания липосом в морских водорослях.
Мониторинг окружающей среды: обнаружение живых и мертвых бактерий, абсолютное количественное определение вирусов, бактерий и микроводорослей, выявление бактериальной плоидности и классификация микроводорослей.
Клиническая диагностика: анализ субпопуляций лимфоцитов, нейтрофилов регуляторных Т-клеток, активация Т-клеток, определение блокирующих антител, определение цитокинов, подсчет гемопоэтических стволовых клеток, иммунофенотипирование лимфом, анализ клеточного цикла и полиплоидии, выявление очагов лейкемии.
Технические характеристики
Лазеры — до 3х одновременно из 3 доступных: 405 нм (100 мВт), 488 нм (60 мВт), 637 нм (80 мВт);
формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 40- и 96-луночных планшетов;
размер частиц от 0,2 до 50 мкм;
скорость сбора данных, события / с — до 50000;
скорость потока, мкл / сек — 15-120;
метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
габариты, Ш × Г × В — 760 × 450 × 470 мм;
вес, кг — 40.
¹MESF, molecules of equivalent soluble fluorochrome — число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.
Простой, удобный в работе проточный цитофлуориметр 7S, от китайской компании BioSino, способен обеспечить до 95% потребностей клеточной лаборатории в области клеточного анализа. Прибор имеет один синий лазер (488 нм), но, несмотря на это, обеспечивает до 7 каналов флуоресцентной детекции и обладает высокой чувствительностью детекции и простым ПО, что делает получение результатов быстрым и максимально комфортным.
7S позволяет реализовать все базовые методы цитометрии в лаборатории: анализ клеточного апоптоза и аутофагии, оценка эффективности трансфекции и уровня экспрессии, изучить фенотипы и субпопуляции лимфоцитов, провести HLA-типирование или анализ индекса фрагментации ДНК спермы человека, а также изучить плоидность растений.
Цитофлуориметр 7S оснащен синим аргоновым лазером 488 нм (50 мВт) и системой детекции из 7 сверхчувствительных светодиодных детекторов, которые регистрируют 5 флуоресцентных сигналов, а также прямое (FSC*) и боковое светорассеяния (SSC**).
Система детекции позволяет работать как с самыми популярными красителями (FITC, Alexa 488, PE, PI), так и тандемными красителями (PE-Texas Red, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7), что позволяет реализовать простые мультиплексные эксперименты.
Демонстрация прибора
Прибор имеется на складе, есть возможность запросить демонстрацию на рабочем месте заказчика. Форма заказа доступна по кнопке «Заказать демо».
Технические характеристики цитофлуориметра 7S
Автоматический забор проб с функцией автоматического промешивания;
ПО на английском языке;
сбор данных / компенсация флуоресценции в 1 клик;
метод определения концентрации клеток – прямой подсчет;
источник возбуждения – синий лазер 488 нм;
каналы детекции:
FL1 – 525/50 нм (FITC/Alexa 488);
FL2 – 585/40 нм (PE);
FL3 – 630/30 нм (PE-Texas Red/ECD/PI);
FL4 – 697/60 нм (PerCP /PE-Cy5 / PE-Cy5.5);
FL5 – 780/60 нм (PE-Cy7);
FSC* чувствительность, мкм – менее 1;
минимальный объем образца, мкл – 90;
чувствительность, MESF*** – не более 150 (по FITC) и не более 50 (по PE);
коэффициенты вариации (CV) для всех каналов, % – менее 2;
хранение +2...+6°C в темноте, транспортировка комнатная температура
842, руб.
60 CNY
G1012-100mL
100 мл
хранение +2...+6°C в темноте
6 737, руб.
479 CNY
DAPI, 4', 6-диамидин-2-фенилиндол, представляет собой обычный флуоресцентный краситель с длиной волны возбуждения 340 нм и длиной волны испускания 488 нм. После реакции с двухцепочечной ДНК, длина волны возбуждения составляет 364 нм, а длина волны испускания — 454 нм.
Способен проникать через клеточную мембрану и реагировать с 2-х цепочечной молекулой ДНК;
используется для окрашивания ядер живых клеток и клеток а так же срезов тканей;
может использоваться использовать для обнаружения клеточного апоптоза;
методы анализа: флуоресцентная микроскопия, проточная цитометрия, флуоресцентная спектроскопия.
Концентрация реагента для окрашивания DAPI составляет 2 мкг/мл, что позволяет непосредственно использовать его для окрашивания ядер клеток или тканей без дополнительных манипуляций. Нормальные ядра флуоресцируют ярко-голубым цветом, но в случае апоптоза клеток, ядро становится плотным и сильно окрашенным или фрагментированным и плотным.
Буфер с хлоридом аммония применяется для лизиса эритроцитов периферической крови человека и мышей, а также суспензий мышиных гематопоэтических тканей (например, спленоциты селезенки). Осмотический стресс приводит к разрушению безъядерных красных кровяных клеток, при этом целостность лимфоцитов и других клеток, содержащих ядра, практически не нарушается. Ядерные эритроциты могут не разрушиться под воздействием хлорида аммония. Буфер поставляется в виде готового к применению раствора.
Состав набора: раствор, готовый к применению, во флаконе.
Буфер фосфатно-солевой (PBS) – используется в иммуногистохимии для промывки стёкол от реагентов и кратковременного хранения иммуногистохимических образцов между процедурами. Концентраты перед применением требуют разведения.
Другой часто используемый буфер для промывки – буфер Трис с Твин-20.
Аннексин V обладает высоким сродством к фосфатидилсерину и признан одним из чувствительных индикаторов для выявления раннего клеточного апоптоза.
Набор также содержит популярный флуоресцентный краситель пропидий йодид (PI), который не проникает в живые клетки, и обычно используется для обнаружения мертвых клеток в популяции.
Подходит для проточной цитометрии и флуоресцентного микроскопа.
Хранить при 4-8 °C до 12 месяцев, аннексин V-FITC хранить при -20 °C без длительного использования.
Набор для определения апоптоза Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit A213 содержит:
PE (фикоэритрин)-меченый Аннексин V и может использоваться в качестве зонда для обнаружения апоптоза с помощью проточной цитометрии.
7-Аминоактиномицин (7-ААД) представляет собой краситель нуклеиновой кислоты, аналог PI, однако отличие 7-AAD заключается в том, что флуоресценция регистрируется в дальней красной области спектра (фильтр 650 нм).
Все компоненты этого набора хранятся при температуре 2-8 °C до 12 месяцев. Окрашивающий раствор Annexin V-PE и 7-AAD следует хранить в темноте и не замораживать.
Регистрация на сайте компании Диаэм доступна только для юридических лиц, для физических лиц сделать заказ и узнать его статус можно без регистрации или обратившись в компанию по телефону +7 495-745-0508 или электронной почте info@dia-m.ru
Для повышения удобства работы с сайтом на нем используются файлы cookie.
В cookie содержатся данные о Ваших прошлых посещениях сайта. Если Вы не хотите, чтобы эти данные
обрабатывались, отключите cookie в настройках браузера.