Гуанидиния тиоцианат — мощный хаотропный агент и денатурирующий реагент, широко применяемый в молекулярной биологии для лизиса клеток и выделения нуклеиновых кислот. Благодаря способности быстро денатурировать белки и эффективно подавлять активность рибонуклеаз (RNase), реагент является одним из ключевых компонентов буферов для экстракции РНК и ДНК.
Принцип действия
Гуанидиния тиоцианат разрушает вторичную и третичную структуру белков, вызывая их денатурацию и деградацию клеточных структур. Это обеспечивает:
- эффективный лизис клеток и тканей;
-
высвобождение нуклеиновых кислот;
-
инактивацию RNase и других нуклеаз;
-
сохранение целостности РНК в процессе выделения.
В классическом методе экстракции РНК с использованием гуанидиния тиоцианата и фенола реагент в сочетании с β-меркаптоэтанолом подавляет активность RNase, а совместно с детергентами способствует полной денатурации белков. При кислых значениях pH ДНК и белки осаждаются, тогда как РНК остается в водной фазе, что обеспечивает ее эффективное выделение.
Области применения
- Выделение общей РНК из клеток, тканей, сыворотки и других биологических образцов;
-
приготовление лизирующих буферов;
-
выделение ДНК;
-
молекулярно-биологические исследования.
