Набор One Step Mouse Genotyping предназначен для быстрого генотипирования мышей, содержит все необходимые реагенты для выделения ДНК и постановки ПЦР. Набор можно использовать для быстрого выделения геномной ДНК из тканей мышей. Мышиную ткань помещают в лизирующий буфер с протеиназой К, инкубируют при 55 °С в течение 20 мин, затем нагревают до 95 °С в течение 5 мин для инактивации протеиназы К. Полученный лизат после центрифугирования можно использовать в качестве матрицы для проведения ПЦР без дополнительной очистки ДНК.
В составе набора имеется 2×Taq Plus Master Mix (Dye Plus), который содержит высокоэффективную ДНК-полимеразу Taq Plus и смесь dNTP, для постановки ПЦР необходимо только добавить праймеры и матрицу (лизат) в реакционную смесь. Таким образом, при работе с набором сокращается количество открывания/закрывания пробирок и пипетирования, что значительно снижает вероятность перекрестного загрязнения образцов, повышает производительность и воспроизводимость результатов. Мастермикс сохраняет стабильность после многократного замораживания и оттаивания. Также Мастермикс содержит в своем составе краситель для нанесения на гель, поэтому электрофорез можно проводить сразу после завершения ПЦР.
Преимущества набора One Step Mouse Genotyping
- Содержит специально разработанный буфер для лизиса на основе протеиназы К;
- лизат используется в качестве матрицы для ПЦР без необходимости выделения ДНК;
- лизат пригоден для амплификации фрагментов ДНК длиной до 2 т.п.н., а также для мультиплексных реакций с использованием до четырех пар праймеров.
Компоненты набора:
|
Компонент
|
PD101-01 (200 реакций)
|
|
Буфер для лизиса тканей мыши (1×)
|
40 мл
|
|
Протеиназа K
|
800 мкл
|
|
Мастер-микс Taq Plus, с красителем для нанесения на гель (2×)
|
5 мл
|
|
25 mM MgCl2
|
500 мкл
|
|
Усилитель ПЦР (5×)
|
2 мл
|
Условия хранения: буфер для лизиса тканей мыши при 2~8 °С; остальные компоненты при -20 °С.